灵芝多糖dpph自由基清除实验？dpph抗氧化实验步骤
本文目录
dpph配制时用什么溶解
活性实验方法（体外实验）
1、清除DPPH能力的测定称取一定量的DPPH，用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液。分别取2mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液，加入2mLDPPH溶液，混合均匀，室温放置30min后，5000r/min离心10min。
dpph清除原理
DPPH是一种较稳定的含氮，有一个单电子，在517nm下有强吸收，如果有其他物质提供一个电子使此单电子配对，其吸收会消失褪色，褪色程度与接受电子的量呈正比。即反应物清除氮的能力与试剂在517nm的吸光值成反比。
dpph实验步骤
方法/步骤
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清除DPPH能力的测定
称取一定量的DPPH，用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液。分别取2mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液，加入2mLDPPH溶液，混合均匀，室温放置30min后，5000r/min离心10min。取上清液于517nm处测吸光值。用Vc作为阳性对照。样品对DPPH的清除率用以下公式计算：
DPPH
A0—2mL无水乙醇+2mLDPPH溶液的吸光值；A1—2mL样品溶液+2mLDPPH溶液的吸光值；A2—2mL样品溶液+2mL无水乙醇的吸光值。
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对Fe2+离子螯合能力的测定
分别取1mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液和3.7mL蒸馏水，加入2mmol/L的FeCl2溶液0.1mL和5mmol/L的菲洛嗪溶液0.2mL，25℃水浴10min，于562nm处测吸光值。EDTA为阳性对照。样品对Fe2+的螯合率计算公式如下：
Fe2+
A0—1mL蒸馏水代替反应体系中样品溶液后的吸光值；
A1—样品溶液反应后的吸光值；
A2—0.1mL的蒸馏水代替反应体系中O
dpph测定的方法
清除DPPH能力的测定称取一定量的DPPH，用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液。分别取2mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液，加入2mLDPPH溶液，混合均匀，室温放置30min后，5000r/min离心10min。取上清液于517nm处测吸光值。用Vc作为阳性对照。样品对DPPH的清除率用以下公式计算：DPPHA0—2mL无水乙醇+2mLDPPH溶液的吸光值；A1—2mL样品溶液+2mLDPPH溶液的吸光值；A2—2mL样品溶液+2mL无水乙醇的吸光值。
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/2对Fe2+离子螯合能力的测定分别取1mL不同浓度（2，4，6，8mg/mL）的溶液和3.7mL蒸馏水，加入2mmol/L的FeCl2溶液0.1mL和5mmol/L的菲洛嗪溶液0.2mL，25℃水浴10min，于562nm处测吸光值。EDTA为阳性对照。样品对Fe2+的螯合率计算公式如下：Fe2+A0—1mL蒸馏水代替反应体系中样品溶液后的吸光值；A1—样品溶液反应后的吸光值；A2—0.1mL的蒸馏水代替反应体系中O
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